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Relatório da Análise em células mitóticas do ápice radicular da cebola
I) Introdução Teórica
As células passam por diversas etapas cíclicas durante seu
desenvolvimento. O ciclo celular é divido em duas fases: Intérfase e
divisão celular: mitose (divisão das células somáticas onde as
células-filhas recebem o conjunto de informações genéticas idênticas
ao da célula parental) ou meiose (divisão das células gaméticas onde
tem início com uma célula diplóide e término com quatro células
haplóides geneticamente diferentes entre si). No caso para a análise
do ápice radicular da cebola só será estudada a mitose que, por sua
vez, também é dividida em etapas.
A intérfase é a fase mais demorada, embora não seja o momento em
que a célula está em divisão, muitos eventos importantes estão
acontecendo em seu interior. As sub-etapas da intérfase são: G1, fase
do crescimento. É quando ocorre a síntese de proteínas (enzimas). S,
o principal evento é a duplicação do material genético. G2, conhecida
como fase de preparação, pois ocorre a síntese de moléculas e
organelas relacionadas ao processo de divisão celular.
O núcleo interfásico (Figura 1) recebe esse nome pois só pode ser
observado durante a intérfase e seus componentes são: Membrana
nuclear ou Carioteca possui uma membrana dupla, porosa e apresenta
ribossomos aderidos; Carioplasma, gel protetor encontrado dentro do
núcleo com componentes nucleares imersos; Nucléolo é um enovelado de
RNAr que é o principal componente químico dos ribossomos; Cromatina é
o conjunto de moléculas de DNA que encontram-se na forma
desespiralizada.
Figura 1
Após a última etapa da intérfase ocorre a primeira etapa da
mitose, conhecida por prófase, que é a etapa mais longa da mitose,
pois ocorre a condensação do DNA, os centríolos migram para os pólos
da célula e há o desaparecimento da carioteca e do nucléolo. A etapa
seguinte à prófase é a metáfase, nela o fuso acromático liga-se aos
centrômeros dos cromossomos, que já estão em seu encurtamento máximo
e, por isso, forma-se a placa equatorial, onde os cromossomos ficarão
dispostos voltados para o centro do plano com os braços voltados para
fora. Na anáfase, fase seguinte, ocorre a fragmentação dos
centrômeros, com isso, há a separação das cromátides, cada uma delas
passando a formar um cromossomo, neste momento ocorre o encurtamento
das fibras do fuso acromático, havendo, então, a ascensão polar (os
cromossomos vão para os pólos). Em seguida, com a telófase, a
cromatina vai descondensar e alongar os cromossomos, o fuso
acromático irá se dissolver e a membrana nuclear reaparecerá dispondo-
se em volta dos cromossomos.
Para ter-se a separação total da célula-mãe com a célula-filha é
necessário que ocorra a citocinese (divisão do citoplasma). Para que
isso aconteça são necessárias duas proteínas: a actina e a miosina
II, elas acumulam-se na linha equatorial da célula que está em
divisão, formando um anel contrátil que com o decorrer do tempo tem
seu diâmetro reduzido, circundando a célula.
II) Objetivos
Os objetivos da atividade foram:
Aprender a manusear o Microscópio Óptico;
Preparar o ápice radicular da cebola em álcool (70%);
Aprender os procedimentos a serem seguidos para a análise das
fases mitóticas;
Analisar as fases mitóticas das células da coifa da cebola.
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III) Materiais e Métodos
III. 1- Materiais químicos e equipamentos:
s
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III. 2- Métodos:
Corta-se a parte radicular da cebola para a indução da mitose,
durante aproximadamente quatro dias, deixar a parte onde crescerá a
nova raiz mergulhada em água, somente esta parte da cebola deve
ficar mergulhada, portanto fincam-se quatro palitos no corpo da
cebola para que haja sustentação.
Após o crescimento da raiz, cortar aproximadamente dois centímetros
(da parta onde se encontra a coifa) no horário entre 8h e 10h, pois
é o horário mais propício à mitose e mergulhá-la em álcool 70%
(30minutos – 3horas).
Retirar do álcool 70%, colocá-la em um tubo de ensaio juntamente ao
ácido clorídrico, levar ao banho maria durante 20 minutos à 60ºC,
para que a parede celular amoleça.
Após os 20 minutos, pegar o material que está dentro do tubo de
ensaio com a pinça, pôr na placa de Petri e retirar o excesso de
ácido clorídrico com o papel absorvente.
Colocar o material, já sem o excesso de HCl na lâmina e, em seguida
aplicar o corante Fucsina sobre o material, após três minutos pôr a
lamínula sobre a lâmina e em seguida fazer o Squash.
Squash: Dobrar em quatro uma folha de papel absorvente, colocar a
lâmina preparada sobre o papel, dobrar o papel sobre a lâmina e
pressionar o polegar na parte da lamínula.
Pôr a lâmina preparada sobre a Platina do microscópio, achar o foco
através dos parafusos micrométrico e macrométrico, escolher o zoom
através das lentes objetivas.
Observação: Para a utilização da lente objetiva de 100x é necessário
o uso de óleo mineral que é posto sobre a lâmina.
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IV) Resultados
Todas as fases mitóticas puderam ser observadas com os procedimentos
que foram feitos.
Células da coifa da cebola coradas com Fucsina (algumas em
Intérfase)
Célula em Prófase
Célula em Metáfase
Célula em Anáfase
Célula em Telófase
V) Conclusão
Através desse experimento aprendemos a manusear o microscópio óptico
de maneira adequada, assim como se tornou de nosso conhecimento a
preparação da raiz da cebola para a análise da mitose, e nos tornou
mais fácil a visualização das suas fases e como a preparação foi bem
sucedida, foi possível observar claramente as diferentes fases da
mitose.
Foram feitas as seguintes observações:
Quando a célula se encontrava em prófase somente foi possível
observar os cromossomos enrolados entre si.
Já em metáfase conseguimos analisar a placa equatorial formada
pelos cromossomos ligados ao fuso acromático.
Em anáfase é possível ver os cromossomos ligados ao fuso
acromático na sua ascensão aos pólos da célula.
Na telófase é possível observar a formação de dois núcleos,
com a cromatina dispersa e os cromossomos não podem ser vistos.
Nesta fase a célula já está sofrendo a citocinese, podemos
observar o estrangulamento.
Após análise é sabido que sem a mitose não seria possível que
houvesse novos seres vegetais, afinal, é a partir dela que temos o
crescimento e o desenvolvimento de qualquer planta.
VI) Referências bibliográficas
SOARES, Rosa, ALMEIDA, Carla, SERRA, Lídia, Técnicas
Laboratoriais de Biologia – Bloco II, Porto Editora, Porto,
2003
Barbieri, Fernanda Machado; Ciclo celular e divisão celular;
2005
Caderno diário, onde foram tomadas as anotações da atividade
experimental
http://www.colegioweb.com.br/biologia/interfase-e-cromossomos
http://www.ufmt.br/bionet/conteudos/15.10.04/citocinese.htm
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Equipamentos:
Lâmina;
Lamínula;
Microscópio óptico;
Tubo de ensaio;
Pinça;
Placa de Petri;
Banho Maria;
Papel absorvente.
Materiais químicos:
Água (H2O);
Álcool (70%);
Coifa da cebola;
Ácido clorídrico (HCl);
Fucsina (corante).
Centro Universitário Estadual da Zona Oeste
Componentes:
Christina Albuquerque
Kamila Oliveira
Paula Moura
Raquel Wainfas
Professora
Claudia Aiub
Ciências Biológicas – 2ºp.
